L’os forme un environnement cellulaire complexe, et est sujet à un renouvellement constant tout au long de l’existence. Son remodelage dépend de trois types cellulaires : les ostéoblastes, les ostéoclastes et les ostéocytes. Le rôle des ostéoblastes consiste en la construction de la nouvelle matrice osseuse, tandis que les ostéoclastes sont responsables de sa dégradation. Tout ceci se fait sous la régulation des ostéocytes. Afin de pouvoir efficacement dissoudre les parties minérales et organiques de l’os, les ostéoclastes mettent en place une polarisation spécifique de leur membrane plasmique afin de créer un microenvironnement confiné, favorable à la résorption. Ce confinement des sites de résorption est dû à la présence d’une zone de scellement ou « sealing zone ». Cette structure à forte densité d’actine a été caractérisée à la fin des années 80, et une vingtaine d’années plus tard des sous-unités ressemblant à des podosomes ont été identifiées à l’intérieur de cette entité. Pourtant, l’organisation interne de la zone de scellement reste encore aujourd’hui peu décrite à petite échelle. Au cours de cette étude, une première caractérisation quantitative à l’échelle nanométrique de la zone de scellement des ostéoclastes humains a été proposée. A l’aide d’une technique de microscopie de superrésolution de pointe, les coeurs d’actine ont pu être identifiés comme des sites de remodelage intense de l’actine. De plus, le traitement des signaux associés a permis de mettre en évidence que ces évènements dynamiques avaient lieu de manière synchrone entre coeurs voisins, et l’analyse de la localisation de protéines majeures de la zone de scellement a suggéré que les coeurs d’acteurs étaient organisés en îlots de taille variable, encerclés de complexes d’adhérence. Les mécanismes cellulaires permettant à cette superstructure d’adhérence de reconnaître les propriétés de surface de la matrice osseuse sont encore méconnus. Ainsi, les travaux menés au cours de cette thèse se sont aussi concentrés sur le développement de substrats compatibles avec l’étude de ces fonctions. Un protocole pour produire des lamelles de verre présentant une couche de polyacrylamide de quelques centaines de nanomètres a été mis au point. Ces supports pourront également permettre à l’avenir d’évaluer des forces appliquées à l’échelle nanométrique. De plus, l’utilisation de ressources de micro- et nanotechnologies a permis de développer des substrats spécialement mis en forme pour l’étude des réponses cellulaires aux nano-topographies. Des lamelles de verres ont été traitées par photolithographie et gravure chimique pour présenter des lignes micrométriques, de hauteur nanométrique, caractérisées grâce à la microscopie de force atomique. De manière générale, les travaux présentés dans ce manuscrit décrivent de nouvelles approches pour caractériser les propriétés structurales et dynamiques de la sealing zone. Du fait de leur polyvalence, ces outils pourront également s’inscrire dans une recherche plus globale concernant les structures d’adhérence cellulaires.